明/暗转换测试的目的是通过评估啮齿动物在新环境中的自发探索行为以及它们对明亮区域的厌恶来评估对照组与疾病模型/干预组中啮齿动物的焦虑样行为。

通常，当放置在新环境中时，啮齿动物会倾向于探索它，但它们也倾向于避开令人厌恶的环境，例如光线明亮的区域。他们的探索活动将反映这些倾向之间的平衡，并将受到他们的焦虑程度的影响。因此，记录了首次进入光照室的延迟、在每个暗室中行驶的距离、暗室之间的转换总数以及在每个暗室中花费的时间。探索行为和在明亮房间里花费的时间减少将表明焦虑。

Light/Dark Box 可以使用多个版本的方案，主要在动物的初始放置和测试持续时间方面有所不同。

Light/Dark Box 的预训练

由于该测试用于评估焦虑样行为，因此应控制所有引起焦虑的变量。因此，理想情况下，动物在测试开始前至少一周将保存在进行测试的相同设施中，以便它们适应测试设施的环境。在整个实验期间，动物应饲养在相同的设施中。

在测试开始前，动物也应适应实验室至少 30 分钟。

使用 Light/Dark Box 评估焦虑样行为

适应房间 30 分钟后，应在隔音实验室进行试验。适应期过后，将动物放入盒子中。动物可以放置在发光室的中间（Costall et al.， 1989;Holmes等人，2003 年）或在暗室中（Heredia等人，2014 年;Müller 等人，2003 年;Oitzl et al.， 2001）。

由于进入光室的延迟可以用作焦虑样行为的指标，因此可以在光室之间使用一扇门，这样动物就不会因为逃离实验者的动机而立即进入光室（Takao 和 Miyakawa，2006）。在这种情况下，动物被放置在 Light/Dark Box 的暗室中，并且在监控暗室的红外摄像机检测到鼠标 3 秒后门会自动打开。

将它们放置在腔室中后（或门打开后），允许小鼠在门打开的情况下在两个腔室之间自由移动 10 分钟。可以记录首次进入光照室的延迟、在每个暗室中行驶的距离、暗室之间的转换总数以及在每个暗室中花费的时间。

盒子可以通过红外光束和TOP-ATPX视频跟踪系统进行监控。该软件可以自动记录动物的活动和运动，包括每个腔室的条目数量、在每个腔室中花费的时间以及在每个腔室中行驶的距离。

每次试验后，应清洁所有腔室，以防止基于嗅觉线索的偏倚。

正如 Crawley 和 Goodwin 在 1980 年描述的那样，在原始版本的 Light/Dark Box 测试中，允许小鼠在两室竞技场中自由奔跑，其中三分之二被照亮，三分之一被黑暗。两个腔室由配备光电管的隔板隔开，整个盒子放在活动监视器上。测量明暗室之间的转换和总运动活动，作为探索活动的指示，持续 10 分钟。

原始版本没有天花板，灯室的墙壁是透明的（Crawley 和 Goodwin，1980 年）。此外，明亮区域的面积较大，这使得能够同时检测明亮空间和开放空间的焦虑反应。

此后，许多作者对其进行了多次修改（Bourin 和 Hascoët，2003 年），即测试的持续时间、每个腔室的相对大小以及光室的材料。

在光照室的天花板和墙壁以及两个相同大小的光照室中使用不透明的白色塑料，可以使明/暗箱测试更专门用于测量明亮空间焦虑。（Takao 和 Miyakawa，2006 年）。

示例数据

从明/暗箱测试中获得的数据通常通过绘制动物在黑暗或光照室中花费的时间来可视化。在光照室中花费的时间可以很容易地绘制成图表，并在对照组和疾病或干预组之间进行比较。

还可以显示首次进入光室的延迟、在每个暗室中行进的距离以及暗室之间的转换总数。然而，由于在亮室中花费的时间被认为是剂量效应药理学评估中最一致和最有用的测量（Hascoët 和 Bourin，1998），我们在右侧的示例图中展示了该测量

使用与此类似的图表来比较不同疾病或治疗组在明亮室中花费的时间，可以很容易地可视化对焦虑样行为的影响。焦虑模型中的动物应该在明亮的房间里花费更少的时间。使用有效的抗焦虑药物可以诱导在明亮区域花费的时间呈剂量依赖性增加。