Elevated Zero Maze (EZM) 是 elevated plus 迷宫(EPM) 的改编版,结合了经典和新的行为学措施。迷宫作为焦虑样行为的行为检测方法越来越受欢迎。它利用了啮齿动物对黑暗、封闭空间的天生偏好,而不是开放空间。与 EPM 不同,EZM 使参与者接受一个连续的回路,该回路具有交替的有墙和无墙区域。
迷宫是根据 Montgomery (1955) 实验的原理开发的,该实验使用高架 Y 型迷宫,其中一个选择臂封闭以模拟安全空间,而另一个选择臂则没有墙壁。Shepherd 及其同事在 1994 年发表的论文中开发了高架零迷宫 (Shepherd 1992, Shepherd et al.,1993) 并对小鼠的焦虑样行为进行了药理学验证。此后,该迷宫作为 Elevated Plus 迷宫的更好替代品越来越受到关注。
高架零迷宫由一条高出地面的圆形轨道组成,分为四个象限。小巷的交替部分(象限)被深色墙壁包围,而其余部分保持开放。EZM 消除了 EPM 中看到的选择点,从而消除了与中央区域相关的歧义。
1、大鼠规格:外形尺寸:1000 x1000 x 250mm x 610mm(直径、墙壁高,支架)
2、小鼠规格:外形尺寸:500 x 500 x 200mm x 610mm(直径、墙壁高,支架)
3、材质:亚克利板材,铝合金框架
为避免阴影并确保所有象限的照明相等,应从上方照亮 EZM。适当的照明还可以确保拍摄对象能够看到食物奖励或其他线索(如果使用)。连接到 TOP-ATPX等跟踪软件的摄像机可以安装在迷宫上方,以协助实时评分、跟踪和记录主题及其在迷宫中的运动。每次试验前后必须彻底清洁设备,以限制先前试验中任何残留刺激的影响。
Elevated Zero Maze 的连续路径设计比 Elevated Plus 迷宫更敏感,因此用于评估焦虑和焦虑样行为。与 EPM 一样,EZM 也利用受试者对开放空间的偏好作为评估治疗组或疾病组与对照组相比的表现的一种方式。
啮齿动物天生偏爱它们感到安全的封闭或封闭空间。因此,他们倾向于避免探索裸露的路径,就像探索封闭的小巷一样。用抗焦虑药物治疗的动物表现出减少的焦虑样行为,并且更有可能探索迷宫的暴露区域。另一方面,由于焦虑感增强,接受抗焦虑药物治疗的动物往往在开放空间花费的时间较少,而探索封闭区域的时间更多。动物在任一区域花费的时间提供了有关对象焦虑状态的信息。
迷宫本身不需要预先训练,因为该任务旨在测试对象对不熟悉的迷宫的反应。在每次试验之前,必须用乙醇溶液彻底清洁设备,以避免残留刺激(如果有)的影响。
零迷宫中类似焦虑的行为的评估
受试者至少在测试前 1 小时被带入测试区域。在测试期间,请务必确保所有照明级别一致并且不会抑制探索行为。
视频录制开始(如果使用),受试者被放置在封闭路段的中央,并允许自由探索迷宫(一些调查将受试者置于空旷区域的中心)。每次测试至少持续 5 分钟,之后对象被小心地从迷宫中移出并放入其家笼中。录制也会在 5 分钟到期时停止。
每个受试者重复试验约 3 天。
与 Elevated Plus Maze 类似,在 Elevated Zero Maze 任务期间测量的变量包括
在空旷区域逗留的时间百分比
在围墙区域逗留的时间百分比
进入开放空间的延迟
在开放区域和封闭区域逗留的总时间
总行驶距离
其他可观察的指标包括:
通过分析从封闭区域内部嗅探的频率和持续时间来计算风险评估行为。(Schulz 等人,2011 年)
通过评估头部在开放区域边缘下沉的次数来降低焦虑程度。(罗杰斯和达尔维,1997年))
常规活动确定为进入封闭空间的次数。受试者在开放空间中度过较短的间隔被翻译为焦虑增加(Pellow et al.,1985)。与减少焦虑相关的行为,例如头部下垂和伸展参加姿势,在接受抗焦虑药物治疗的动物中往往会增加。
使用图表可以很容易地比较接受焦虑减轻药物治疗的动物和假对照组。用盐水处理的动物自然对开阔、暴露的区域持谨慎态度,并且往往具有较高的潜伏期,并且在开阔区域花费的时间百分比也较低。那些用抗焦虑药物(如地西泮和氯氮卓)治疗的动物表现出潜伏期减少,在开放区域度过的时间百分比更高。这些动物也可能表现出较少的焦虑相关行为,例如伸展的出勤姿势。通常,大约 10 只动物的动物队列足以使用 1 因子方差分析、ANCOVA 或事后检验获得 <0.05 的 p 值(Shepherd 等人,1994 年,Cook 等人,2002 年,Braun 等人,2010 年,Heredia 等人,2013 年)。