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三室社交范式是基于小鼠天生喜群居、对新物件具有探索倾向的特性而开发的一种广泛使用的范式，用于量化啮齿动物的普遍社交性和社会新颖性。社会行为和社会认可的破坏是许多神经精神疾病（如精神分裂症、双相情感障碍）的特征，也是神经发育障碍（如自闭症）的明显症状。
该装置允许评估社会行为的不同方面，有社交能力（sociability）——陌生社会个体与空腔室的选择、社交新奇（social novelty）——相对熟悉个体与陌生个体的选择和社交记忆（social memory）——识别已社交的个体作为熟悉个体等。
实验应用
是专用于啮齿类动物社交行为能力评估的装置；最常见应用于ASD（自闭症谱系障碍）转基因小鼠模型中社交缺陷的表型分析，以及评估治疗策略的有效性，广泛应用于药理学、毒理学、神经生物学、心理学等研究领域。
实验装置
01
基础配置
三腔社交箱整体为一个矩形地面的箱子（小鼠：60 x 40 x 30cm，40x 20 x 22cm等，尺寸可定制；大鼠根据体型选择尺寸较大的箱体。），顶面即观察面为开放式。箱体内部被分隔板划分为三个均匀腔室，隔板通常为透明玻璃树脂板。相邻腔室之间有可移动门 ，供实验动物穿过。
箱体整体可用医用有机板、不锈钢等材料制作，墙壁可以是透明的或不透明的。
两侧室根据实验需求可配置实验专属限位笼，目前常见有三种形状，圆柱体、倒置杯形、长方体箱式，一般尺寸为7cm~10cm（边长/直径） x 20cm（高）左右，应保证社会刺激小鼠在笼内能自由转动身体，并且侧面腔室在除去限位笼的空间能供实验小鼠自由探索；限位笼侧表面的围墙由一根根杆组成，杆之间间隙约为1cm，不至于让动物伸出身体，但足以让两只动物进行互动和嗅探。
02
智能化配置
符合箱体尺寸的支架，可以在箱体上方固定相机。相机为高清相机，黑白/彩色，支持对实验画面采集或录像。根据环境情况配置光源。
配置自动门，可用电脑控制门的开闭。
03
个性化配置
两侧室的接触地面可根据需要改为不锈钢杆格栅或多孔不锈钢地板，墙壁也可增加多种视觉提示。
实验设计
一
实验前准备
动物：
（1）陌生鼠训练
（2）受试小鼠标记。
在尾巴或皮毛上使用深色钢笔标记、爪子纹身、打耳孔、耳标或皮下应答器，提前标记受试者小鼠以进行识别。
（3）测试前适应。
提前将动物移送入行为学实验室，远离三箱放置。放置处光强为 10 lx 左右，让测试小鼠适应新环境至少30分钟。
将陌生鼠移入其他房间，房间的光照条件、温度与行为学测试房间一致。等待实验开始，适应 至少30 分钟。
环境：
房间整体环境尽量减少视觉、嗅觉和听觉线索。
调整照明。尽量使箱内光线均匀，三箱两侧中心位置的光强为 30～40 lx，两侧室的读数差值小于 2 lx。确保三箱底部没有反光及阴影。
设置房间温度 21～23℃，湿度（50±20）％及噪声70 dB以下。
箱体环境左右保持对称平衡，避免环境差异带来的实验动物对左右腔室的偏好性。
设备：
用蘸有 70％乙醇和水的纸巾彻底擦拭三箱、笼，再用水擦拭，后用纸巾擦干，最后在测试前进行风干。
用记号笔标记笼的位置，以防后续实验中三箱及笼的位置发生变化。限位笼一般放置于正对门口的位置，基本位于侧室中心；也可以放置于侧室角落，但需保持箱体沿短中轴线对称或整体呈中心对称，以此来尽可能减小两侧室的差异性。
固定并连接高清相机，调整角度，使画面正好覆盖箱体；调节亮度及对比度等，使画面清晰。连接自动门、电击装置等部件至电脑端，使用轨迹追踪系统进行动物活动轨迹的追踪记录及各项刺激的控制。
软件：
a.填写动物及实验基本信息。
b.绘制比例尺，以将画面数据等比例转换成真实数据。
c.划分观察区及分析区。主要分析区有三个腔室、金属限位笼所在区域。
d.设置阈值。输入阈值距离，便于系统计算是实验鼠否进入社交状态。一般为限位笼外3~5cm。
二
实验步骤
动物行为学实验一般在 9：00-17：00 进行，时间太早或太晚都会影响动物节律。
社交能力测试
{ 2阶段SE方法 }
1. 第一阶段，习惯阶段（10分钟）
在左、右两箱中放置空笼子，让受试小鼠自由活动，检测受试小鼠是否对某个空笼子有偏好。
（1）三箱中不放笼，将中间箱两侧的门关闭。
（2）随机抓取饲养笼中的一只受试鼠，轻放入空鼠笼或其它运输工具，运送到三箱位置，并轻轻将动物放入中间箱，脸朝向上/下的无门墙壁，全程不暴力抓取实验鼠。
（3）实验人员离开测试区域，并开始计时 5 分钟。
（4）5 分钟后，将中间箱左、右两侧门打开，让受试动物自由穿梭于左、右两箱之间 5 分钟。
（5）分析 5 分钟内动物在左、右两箱的活动时间，若在两箱的活动时间差超过 50 秒，则轻轻将动物驱赶入中间箱，重新进行（4）步骤；若差异依然超过 50 秒，则淘汰该动物。
（6）实验动物在社交箱内熟悉完成后，放回饲养笼中休息5分钟。期间对社交箱进行清洁工作。
2．第二阶段（15分钟）
在一侧放置空笼子，另一侧放置一只同种陌生小鼠（Stranger1，S1），检测受试小鼠对陌生小鼠的偏好是否优于另外一侧空笼子。
（1）实验开始前，将小鼠放在行为学实验室适应半个小时。
（2）用透明的玻璃树脂板将三个箱子隔开，并将测试小鼠放进中间的箱里适应 5 分钟。
（3）将 S1 随机放进左侧或右侧的笼里，另外一侧的笼空着。
（4）去掉隔开箱子的玻璃树脂板，使测试小鼠可以在三个箱子中自由活动 10 分钟。
（5）拍摄并记录相关参数，包括测试鼠与 S1 或空笼之间的直接接触的次数和持续时间（金属笼周围 3～5cm 定义为接触范围），以及受试鼠进入每个箱子的次数和持续时间（当小鼠的头和四爪都进入一个箱子就认为它处在那个箱子中）。
（6）将实验鼠送回饲养笼，休息5分钟，期间用酒精与水彻底擦拭三箱及金属笼，待三箱干燥后进行下只动物的实验。
{ 3期S-NS方法 }
首先，在左右两个侧室各放置一个空笼子，打开隔门，让实验鼠自由活动10分钟，以减少这些物体的新颖性（习惯期）。活动结束送回饲养笼休息5分钟，期间对装置进行清洁工作。
接下来，将两个相同的物体（纸球）放入笼子中，以使动物熟悉笼子中包含的物体的存在，计时10分钟，待动物在三个腔室内活动完毕后送回饲养笼休息并清洁装置。
最后，在一个笼子下引入社会刺激（年龄和性别匹配的野生型小鼠），并在另一个笼子下放置新颖的非社会刺激（木块）（测试阶段）。记录与任一刺激互动所花费的时间量，以评估动物对社会刺激而不是非社会刺激的偏好水平。活动时间共计10分钟，结束后送回饲养笼并清洁装置。
社交记忆与社交新奇测试
向上述实验中空着的笼子中放入同种陌生小鼠（Stranger2，S2），原先放置S1的笼子中仍然放置S1。将实验鼠放置于中间的起始腔室，打开双侧的移动门，然后记录 10 分钟，观察受试鼠与 S1 和 S2之间相互接触的时间和次数。因为受试小鼠已经探究过 S1，如其仍然能辨识 S1（社交再识别/社交记忆），就会对未探究过的 S2 探究得更多（社交新奇）。
三
评价指标
测试鼠与空笼或S1或S2之间的直接接触的次数和持续时间（金属笼周围 3～5cm 定义为接触范围）。
受试鼠进入每个腔室的次数、持续时间和总路程（当小鼠的头和四爪都进入一个箱子就认为它处在那个腔室中）。
社交能力：社交指数［社交时间/（社交时间＋探索时间）x100％］，以及动物运动的总距离。
社会偏好指数ISP = (TS-TNS)/(TS+TNS)；TS为社会刺激接触时间，TNS为非社会刺激的接触时间。
各腔室进入前的潜伏期及总路程。
单次最长连续接触时间。
四
注意事项
（1）交配和单笼饲养经历会明显影响社交测试结果。因此，一般应使用未交配过且多只同笼饲养的动物。
（2）每只动物实验结束后应进行环境清理，尽可能去除上一只动物的气味。
（3）社交实验在不同动物间会有很大差异，建议每组使用约 10 只动物。
（4）视频软件追踪过程中，建议开启三点识别。追踪头部轨迹，以头部嗅探为社会交互的标志。
（5）无论何时，都要耐心、轻柔地将动物驱赶入中间箱，不能提起动物尾部或强迫动物。
（6）陌生鼠的数量尽量保持在5只以内，以免影响结果的准确性。
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